Natrijev citratni pufer se pogosto uporablja za izolacijo RNA, saj zmanjšuje bazno hidrolizo RNK pramenov, zaradi česar je neprecenljiv za čiščenje mRNA med genomski raziskave in za preučevanje transkripcije. Puferi na osnovi citrata pomagajo tudi pri odkrivanju antigenov v pripravkih s fiksnim tkivom, ker prekinejo navzkrižne povezave med antigeni in fiksacijskim medijem.
Z naslednjimi preprostimi koraki lahko ustvarite pufer natrijev citrat s pH 6 (kisel) v manj kot 10 minutah.
Materiali za pufer z natrijevim citratom
Za izdelavo pufer natrijevega citrata je potrebnih malo materialov. S citronsko kislino potrebujemo le 1M natrijevega hidroksida, destilirano vodo in kalibrirano pH sondo. Natrijev citrat ni obvezen.
Za izdelavo pufra so potrebni tudi 1-litrski merilni valj, 1-litrska merilna bučka in tri litrske steklenice. Končno boste potrebovali magnetno mešalno palico in magnetni mešalnik. Vsa ta gradiva so na voljo v šoli, laboratoriji na delovnem mestu ali biti kupljeni na spletu ali v trgovinah s posebnimi izdelki.
Dve možnosti za izdelavo blažilnika
Obstajata dva načina izdelave puferjev natrijevega citrata, odvisno od materialov, ki so vam na voljo.
- Če imate tako citronsko kislino kot konjugatno osnovo, ustvarite osnovno raztopino vsakega z mešanjem 21 gramov citronske kisline v 1 litru destilirane vode in 29,4 grama natrijevega citrata v 1 litru destilirane vode voda.
- Če imate samo pri roki citronsko kislino, zmešajte 2,1 grama v nekaj manj kot 1 litru destilirane vode.
Mešanje raztopin citronske kisline in natrijevega citrata
Zmešajte 82 mililitrov raztopine citronske kisline z 18 mililitri raztopine natrijevega citrata. V to dodajte dovolj destilirane vode, da se prostornina mešanice nekoliko pod 1 liter.
Prilagajanje pH
Medtem ko raztopino nežno mešamo z magnetnim mešalnikom, uporabimo 1M natrijevega hidroksida, da pH zmesi prilagodimo na 6,0. Nato z merilno bučko dodajte več destilirane vode, da končni skupni volumen raztopine dosežete točno 1 liter.